Правила шоу «Не спать!» отличаются от привычиных юмористических боев. Для того, чтобы принять участие в программе, необходимо заплатить взнос — 10 000 рублей. Взносы всех участников составляют призовой фонд. Далее игра проходит в три этапа: выступление-заявка, импровизация и суперфинал. На каждом этапе участникам нужно изо всех сил постараться рассмешить жюри, состоящее из троих известных юмористов. Иначе — немедленный вылет с ринга с потерей денег. В последний тур выходят лишь двое. Победитель получает все деньги призового фонда.
Поскольку шоу «Не спать!» выходит в эфир после полуночи, юмор в программе по-настоящему жесткий, взрослый, практически без каких-либо ограничений.