Экранизация повести из цикла Н.В. Гоголя «Вечера на хуторе близ Диканьки». Теплой майской ночью на берегу реки собирается молодежь, гуляет и поет песни. По местной легенде, когда-то в этой реке утопилась прекрасная панночка, которая бросилась в реку, спасаясь от злой мачехи. Панночка стала утопленницей, и с тех пор в этой реке местные жители не купаются темными ночами. Тем временем молодой казак Левко, сватающийся к красавице Ганне, узнает, что у него есть соперник за сердце девушки — его собственный отец. «Майская ночь» — один из первых цветных фильмов советского кинематографа.